SRM 2391d 基于PCR的DNA分析標準品主要用于基于聚合酶鏈反應 (PCR) 的基因檢測的法醫和親子鑒定質量保證程序的標準化,用于教學執法或非臨床研究目的,以及在以下情況時用于質量保證為內部控制材料賦值。它不適用于任何人類或動物臨床診斷用途。該 SRM 由兩種形式的充分表征的人類脫氧核糖核酸 (DNA) 組成;基因組 DNA(組分 A 到 D)和從已點到 FTA 紙上的細胞中提取的 DNA(組分 E)。組件的完整列表包含在表 1 中。一個 SRM 2391d 單元由一個小瓶組成,每個小瓶五個組件中的每一個都包裝在一個盒子中。
認證值:
NIST 認證值是 NIST 對其準確性有最高置信度的值,因為所有已知或可疑的偏差來源都已調查或考慮在內 [1]。 SRM 2391d 中組件的認證值來自毛細管電泳 (CE) 和下一代基于測序 (NGS) 的表征允許在基因座處對短串聯重復 (STR) 進行計數和直接測序。通過使用多個基于 PCR 的 STR 分型試劑盒和基于 NGS 的試劑盒和技術建立了高可信度等位基因調用。 SRM 2391d 中認證的 STR 等位基因調用可追溯至自然單位計數 1,通過對 CE 和 NGS 數據的分析計算重復單元的數量 [2]。表 2 和表 3 列出了用于表征常染色體 STR 基因座、Y-STR 基因座和 X-STR 基因座的基于 CE 和 NGS 的方法。
儲存:
SRM 2391d 基于PCR的DNA分析標準品冷藏在攝氏2度至攝氏8度的溫度范圍內(不要冷凍)。
用途:
A至D組分的小瓶應在開瓶前進行短暫的渦流離心。開瓶后,應立即取出樣品進行分析,并立即進行處理,以獲得適用的證明值。成分E,即FTA紙上的細胞,應清洗以減少PCR抑制劑和鹽之前的PCR擴增。
資料來源:
NIST公司為A~C‘組分制備的人基因組DNA cxtracts是在NIST研究中心批準下,從單來源匿名獻血者的白血球中提取出來的,此SRM是經NIST測定后研制的。E組分所用的細胞系是根據許可證和物質轉讓協議從美國型文化收藏公司(Manassas,VA)獲得的。在使用前,所有原料均被檢測為HBsAg、HIV、HCV和HIV-1AG陰性。
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